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抗流感病毒药物筛选和药效学评价
      流感病毒（Influenza viruses）属正粘病毒科，是 RNA 病毒，其致病性高、传播快，可引发大规模流感流行。流感是流行性感冒的简称,是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，能引起心肌炎、肺炎、支气管炎等多种并发症。它引起的流行性感冒具有传染性强、发病率高，波及面广和死亡率高的特点。全世界每年有 10%-20% 的人口遭受流感病毒的感染，由其所致的急性呼吸道感染疾病每年导致超过五十万的人死亡。目前国际上已研制出一些药物用于防治流感，根据作用机制分为两类，第一类是上市较早的离子通道阻断剂,以金刚烷胺和金刚乙胺为代表，第二类是神经氨酸酶抑制剂, 以扎那米韦和奥塞米韦为代表。这两类药物均有不同程度的副作用和产生病毒耐药性，都存在不尽如人意之处，因此，流感仍是迄今未被人类有效控制的病毒性传染病。抗流感药物活性筛选应用 MDCK 细胞和昆明鼠作为筛选模型，检测体外药物对感染细胞的保护作用（CPE 观察及MTT法检测）、药物对病毒感染动物的死亡保护作用等指标评价抗流感病毒新药。

体外抗流感病毒药效检测

材料与方法
  1. 体外细胞模型：MDCK 细胞。
  2. 病毒株：流感病毒A型。
  3. MTT 法检测药物对细胞的毒性。
  4. CPE 法(细胞病变)检测药物对流感病毒的抑制作用。
  5. 阳性药物对照:利巴韦林。
试验过程
  1. 药物的细胞毒性检测MDCK 细胞在 96 孔细胞培养板中培养形成单层后，加入不同浓度的药液，继续培养3天，用 MTT 法检测药物对 MDCK 细胞的毒性。
  2. 药物抗流感病毒作用检测MDCK 细胞在 96 孔细胞培养板中培养形成单层后，用 100TCID50 的流感病毒感染细胞，再加入无毒浓度下的系列浓度的含药培养液，继续培养 3 天，经 CPE 法确定药物对流感病毒的抑制作用。
体内抗流感病毒药效检测

材料与方法
  1. 动物模型: 昆明小鼠。
  2. 病毒株: 流感病毒 A 型鼠肺适应株。
  3. 阳性药物对照:利巴韦林。
试验过程
  1. 流感病毒对小鼠半数致死量(LD50)的测定昆明种小鼠,雌雄各半，雌雄分笼饲养。分别滴鼻感染不同稀释度的病毒液，每天观察，至感染后第 14 天为止。以死亡和生存为指标,计算病毒的半数致死量(LD50)。
  2. 药物对流感病毒感染小鼠的死亡保护试验昆明种小鼠,雌雄各半，雌雄分笼饲养。经滴鼻感染 10×LD50 的流感病毒后，给予药物，共给药六天。各组小鼠均自感染之日起观察二周，观察小鼠发病症状，记录死亡时间，死亡数，计算死亡率 %，死亡保护率 %、平均生存时间和生命延长率 %。